PCNA Antibody Reagent for Immunohistochemistry

【Nome do produto 】

Anticorpo IHC --  PCNA

【 Especificação da embalagem 】

【Uso pretendido 】

Apenas para uso em pesquisa. O reagente PCNA Antibody destina-se a ser usado para identificar qualitativamente PCNA por microscopia em seções de tecido FFPE usando sistema de detecção imuno-histoquímica.

【P rincipio 】

PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen), desempenha um papel central na coordenação da associação de fatores de replicação durante a replicação do DNA, bem como durante o reconhecimento e reparo de danos ao DNA. O anticorpo PCNA detecta células em proliferação em células normais e tumorais. O índice de marcação de anti-PCNA demonstrou estar associado ao prognóstico do tumor. Adicione o anticorpo primário para ligar o antígeno nas seções de tecido e, em seguida, use o anticorpo primário de ligação do anticorpo secundário marcado com HRP para formar o complexo anticorpo secundário-anticorpo primário-antígeno. Quando a solução cromogênica DAB é adicionada, o HRP reage com o substrato enzimático para produzir um produto de reação marrom insolúvel, indicando indiretamente a existência do antígeno. 

【Principais componentes 】

I imunoglobulina, diluente de anticorpo

【Armazenamento 】

Armazene a 2～8℃  por 18  meses .

【Requisitos de amostra 】

Os tecidos FFPE são geralmente cortados em seções tão finas quanto 3 ~ 5 μm com um micrótomo.  Essas seções são então montadas em lâminas de vidro que são revestidas com um adesivo de tecido.

【Protocolo 】

1.  Preparação da  amostra ： Desparafinize as  lâminas em xileno Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ  por 5 minutos ; _ _ Lavar as lâminas com água desionizada durante 30 segundos.

2 . Bloqueio : Bloqueie a atividade da peroxidase endógena incubando seções em  solução  de H ₂ O _{2 a 3%} à temperatura ambiente por 5 minutos para  bloquear a atividade da peroxidase endógena. Lavar as lâminas com água desionizada durante 30 segundos.

3 . Recuperação de antígeno : Aqueça o tampão de recuperação de antígeno EDTA a 100 ℃ . Em seguida, coloque as lâminas no tampão fervido e continue a aquecer por 15 ~ 20 min. Esfrie naturalmente por 30 minutos. Enxágue a amostra com tampão de lavagem.

4 . Incubação do anticorpo primário: Drene as lâminas. Adicionar anticorpo primário ao tecido , incubar em temperatura ambiente por  30 minutos . (use diluente de anticorpo ou PBS como controle) . Lave as lâminas em PBST por 2 vezes, 5 minutos de cada vez. Se o anticorpo primário estiver concentrado, dilua-o em RTU (pronto para uso) de acordo com as informações na embalagem . 

5.  Anticorpo  secundário : Drene as lâminas. Adicionar anticorpo secundário ao  tecido e incubar à temperatura ambiente durante  20 minutos . Lave as lâminas em PBST por 2 vezes, 5 minutos de cada vez .

6. DAB ：Escorra as lâminas. Adicionar DAB  ao tecido e incubar à temperatura ambiente durante 5 min. Lavar as lâminas com água desionizada.

7. Coloração de hematoxilina : Drenar as lâminas. Adicionar hematoxilina ao tecido e incubar em temperatura ambiente por 5 minutos . Lavar as lâminas com água. Use a solução ácida para diferenciação . Lavar as lâminas com água.

8. Desidratar : Desidratar as lâminas em álcool 75% , 95 % , 100%  por 2 minutos .  Seque as lâminas. Cubra o tecido manchado com uma lamínula usando meio de montagem.

【Localização positiva 】

1. Localização positiva:  nuclear .

2. Controle positivo:  câncer de mama .

【Precauções 】

1.  Leia atentamente as instruções e familiarize-se com todos os componentes do kit antes de usar. Siga rigorosamente as instruções durante a operação.

2.  NÃO use o kit ou qualquer componente do kit após a sua.

3.  Somente profissionais treinados podem usar este kit. Use jaleco adequado e luvas descartáveis ​​ao manusear os reagentes.

4.  Evite o contato da pele, olhos e membranas mucosas com os produtos químicos.

5.  NÃO pipete com a boca.

6.  Reagentes não utilizados, kits usados ​​e resíduos devem ser descartados de acordo com os regulamentos locais.

【Fabricante 】_

Nome da empresa: Xiamen Talent Biomedical Technology Co.,Ltd

Endereço: nº 3º e 4º andares, edifício B10, nº 2068 Wengjiao Road West, BioMedical Park, distrito de Haicang, cidade de Xiamen, 36100 China

Telefone: +86 592 6315755            

E-mail : tlsw@talentbiomedical.com                

Site : www.talentbiomedical.com

【 Símbolos 】