Sistema de detecção iVision™ IHC

Nome do Produto

iVision ^TM Poly-HRP cabra anti-rato, coelho IgG 

Especificação de embalagem

Uso pretendido

Apenas para uso em pesquisa. iVision ^TM Goat anti-Mouse, Rabbit IgG, conjugado com peroxidase destinado à detecção cromogênica de antígenos direcionados que reagiram a um anticorpo primário fornecido pelo usuário em tecido humano. Recomenda-se que os reagentes não sejam substituídos em kits ou números de lote. 

C arterísticas de Desempenho 

Verificou-se que os sistemas de detecção são sensíveis e mostram ligação específica ao anticorpo primário com mínima ou nenhuma ligação não específica. Os sistemas de detecção iVision ^TM mostraram ser reprodutíveis e consistentes em uma única execução, entre execuções e entre lotes. Os produtos foram considerados estáveis ​​durante os períodos especificados por testes em tempo real. 

P rincipio

Os antígenos em tecidos e células são detectados em imuno-histoquímica (IHC) por um processo de duas etapas: a ligação de um anticorpo primário e a posterior detecção dessa ligação pelo sistema iVision ^TM Detection. Os tecidos são seccionados e montados em uma lâmina. O anticorpo primário produzido no camundongo é então aplicado para reagir com os antígenos direcionados, seguido pela aplicação de Poly-HRP Goat anti-Mouse, Rabbit IgG para reagir com os anticorpos primários e, finalmente, uma solução de substrato/cromógeno, como DAB ou AEC, que é convertido pela peroxidase em depósito insolúvel. Todo o procedimento gera um perfil visível de localizações de antígenos em seções de tecido ou em tipos de células. 

Componentes principais

Anti-Camundongo de Cabra, IgG de Coelho, Conjugado com Peroxidase

Armazenar

Armazene a 2～8℃  por 18  meses .

Requisitos de amostra

Os tecidos FFPE são geralmente cortados em seções tão finas quanto 3 ~ 5 μm com um micrótomo.  Essas seções são então montadas em lâminas de vidro que são revestidas com um adesivo de tecido.

Protocolo

1.  Preparação da  amostra ： Desparafinar as  lâminas em xileno Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ  por 5 minutos ; _ _ Lavar as lâminas com água desionizada durante 30 segundos.

2 . Bloqueio : Bloqueie a atividade da peroxidase endógena incubando seções em  solução  de H ₂ O _{2 a 3%} à temperatura ambiente por 5 minutos para  bloquear a atividade da peroxidase endógena. Lavar as lâminas com água desionizada durante 30 segundos.

3 . Recuperação de antígeno : Aqueça o tampão de recuperação de antígeno EDTA a 100 ℃ . Em seguida, coloque as lâminas no tampão fervido e continue a aquecer por 15 ~ 20 min. Deixe esfriar naturalmente por 30 minutos. Enxágue a amostra com tampão de lavagem.

4 . Incubação do anticorpo primário: Drene as lâminas. Adicionar anticorpo primário ao tecido , incubar em temperatura ambiente por  30 minutos . (use diluente de anticorpo ou PBS como controle) . Lave as lâminas em PBST por 2 vezes, 5 minutos de cada vez. Se o anticorpo primário estiver concentrado, dilua-o em RTU (pronto para uso) de acordo com as informações na embalagem . 

5.  Anticorpo  secundário : Drene as lâminas. Adicione o anticorpo  secundário iVision ^TM  Poly-HRP Goat anti-Mouse, Rabbit IgG ao tecido e incube à temperatura ambiente durante 20 minutos . Lave as lâminas em PBST por 2 vezes, 5 minutos de cada vez . 

6. DAB ：Escorra as lâminas. Adicionar DAB  ao tecido e incubar à temperatura ambiente durante 5 min. Lavar as lâminas com água desionizada.

7. Coloração de hematoxilina : Drenar as lâminas. Adicionar hematoxilina ao tecido e incubar em temperatura ambiente por 5 minutos . Lavar as lâminas com água. Use a solução ácida para diferenciação . Lavar as lâminas com água.

8. Desidratar : Desidratar as lâminas em álcool 75% , 95 % , 100%  por 2 minutos .  Seque as lâminas. Cubra o tecido manchado com uma lamínula usando meio de montagem.

R esultados esperados _ 

O uso adequado deste reagente resultará em coloração clara e intensa nos locais do antígeno, tanto na amostra quanto no controle positivo. Qualquer desvio desses resultados esperados deve fazer com que os usuários questionem os resultados e consultem o serviço técnico ou o distribuidor local para obter assistência.

Precauções

1.  Leia atentamente as instruções e familiarize-se com todos os componentes do kit antes de usar. Siga rigorosamente as instruções durante a operação.

2.  NÃO use o kit ou qualquer componente do kit após a sua.

3.  Somente profissionais treinados podem usar este kit. Use jaleco adequado e luvas descartáveis ​​ao manusear os reagentes.

4.  Evite o contato da pele, olhos e membranas mucosas com os produtos químicos.

5.  NÃO pipete com a boca.

6.  Reagentes não utilizados, kits usados ​​e resíduos devem ser descartados de acordo com os regulamentos locais.

Fabricante _

Nome da empresa: Xiamen Talent Biomedical Technology Co.,Ltd

Endereço: nº 3º e 4º andares, edifício B10, nº 2068 Wengjiao Road West, BioMedical Park, distrito de Haicang, cidade de Xiamen, 36100 China

Telefone: +86 592 6315755            

E-mail : tlsw@talentbiomedical.com                

Site : www.talentbiomedical.com

Símbolos